人生就是博-尊龙凯时为您提供MOPC小鼠少突胶质前体细胞的培养说明书。以下为详细的细胞培养条件及步骤，以保证细胞生长的稳定性和实验的成功率。

一、细胞培养条件

细胞名称：MOPC小鼠少突胶质前体细胞

生长特性：贴壁生长

冻存条件：无血清冻存液（货号：C7001）

培养体系：DMEM+10%FBS+1%双抗

传代方法：第一次建议1:2传代。培养两天后进行换液，注意使用无菌离心管收集培养基以备比较；如比较结果不理想，建议直接购买我们的完全培养基。

二、收到细胞后的处理

将细胞培养至良好状态后，应将完全培养液灌满并密封瓶口，以便于运输。收到细胞后，需用75%酒精喷洒整个细胞瓶进行消毒，然后放置于超净工作台进行无菌操作。细胞瓶应放入37℃、5% CO2培养箱中静置3-4小时以稳定细胞状态，随后进行处理。请用显微镜观察细胞生长，并拍摄不同倍数的照片（建议40x, 100x, 200x各一张），前三天的照片将作为重要的售后依据，未提供照片将默认收到的状态良好。

三、细胞培养步骤

a. 细胞传代

1. 若未超过80%汇合度，收集培养液于离心管中，保留5ml完全培养基于37℃、5%CO2中培养；如细胞密度超过80%，则可进行传代。传代步骤如下：

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁的PBS清洗细胞1-2次。
2. 加入0.25%胰蛋白酶消化液约1-2ml，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，观察至细胞大部分变圆脱落后，迅速轻敲瓶底，加5ml以上完全培养基终止消化。
3. 轻轻吹打使细胞完全脱落，转移悬液至15ml离心管中，在1000RPM下离心5分钟，弃去上清，加入1-2ml完全培养基重悬。
4. 按1:2的比例进行分瓶传代，补充新的完全培养基至5-8ml/瓶，放入37℃、5%CO2培养箱中培养。

b. 细胞冻存

1. 当细胞覆盖培养瓶的80%时，弃去培养液并用PBS清洗。

2. 加入0.25%胰蛋白酶消化液约1ml，观察后加入5ml完全培养基终止消化，再轻轻吹打细胞使之脱落，并转移悬液于15ml离心管中，1000rpm离心5分钟。

3. 弃去上清液，沉淀细胞后加入1ml雅吉生物无血清冻存液（货号：C7001），混合后加入冻存管中。

4. 将冻存细胞直接放入-80℃冰箱，若需转入液氮罐，应在-80℃保存至少24小时。

c. 细胞复苏

1. 从液氮中取出冻存管，迅速置于37℃水浴中解冻至无结晶，外壁用75%酒精消毒。

2. 将细胞移至含5ml完全培养基的15ml离心管中，1000rpm离心5分钟。

3. 弃去上清，加入5ml完全培养基重悬后接种于T25培养瓶中，置于37℃、5%CO2培养箱中继续培养。

4. 第二天更换为新鲜完全培养基继续培养。

四、注意事项

在运输过程中可能出现细胞脱落，这是正常现象。如脱落较多，可将培养液收集并离心，同样适用以上的操作方法进行细胞传代。

五、售后条款

1）可重发的情况

如遇细胞运输问题、污染、细胞活性问题等，提供真实实验结果及细胞状态照片可申请重发。

2）不予重发的情况

如因客户操作不当或细胞培养不当导致的问题，将不予以重发。

通过人生就是博-尊龙凯时，我们致力于提供完善的细胞培养方案和优质的售后服务，确保您的实验顺利进行。